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離心技術(shù)分離穩(wěn)定DNA的方法研究

導(dǎo)讀:超速離心機(jī)是分子生物實(shí)驗(yàn)室最常用的科研儀器之一，能將具有不同沉降系數(shù)、質(zhì)量和密度的混合物在離心機(jī)高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力場作用下進(jìn)行快速分離、濃縮和純化。密度梯度區(qū)帶


返回列表 來源：未知 發(fā)布日期：2020-03-11 11:05【大 中 小】
超速離心機(jī)是分子生物實(shí)驗(yàn)室最常用的科研儀器之一，能將具有不同沉降系數(shù)、質(zhì)量和密度的混合物在離心機(jī)高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力場作用下進(jìn)行快速分離、濃縮和純化。密度梯度區(qū)帶離心法(簡稱區(qū)帶離心法)，是超速離心機(jī)常用的一種離心方法，在一定的離心力下將加入惰性梯度介質(zhì)的樣品進(jìn)行離心沉降，把所需的顆粒分配到梯度中某些特定位置，形成不同區(qū)帶的分離方法。該法能夠在保持顆?；钚詶l件下很好地將不同顆粒的物質(zhì)進(jìn)行分離。

密度梯度離心技術(shù)是實(shí)現(xiàn) SIP-DNA 樣品分離的關(guān)鍵技術(shù)，本研究通過實(shí)驗(yàn)獲得了超速離心機(jī)分離SIP-DNA樣品的最佳條件（以CsCl為惰性介質(zhì)，在20℃，45000g離心48小時(shí)，離心后分為14層）。根據(jù)每層的浮力密度和DNA濃度這兩個(gè)參數(shù)可以判定分離是否成功，成功分離后的重的同位素樣品與正常樣品相比不僅相同層數(shù)浮力密度大，在相同浮力密度層DNA濃度最大位置也會(huì)比較靠后。

該技術(shù)可為后續(xù)16SrRNA高通量測序提供前提和保障。根據(jù)高通量數(shù)據(jù)結(jié)果可以從整體水平上反應(yīng)環(huán)境樣品微生物群落水平，也可以更準(zhǔn)確的認(rèn)識(shí)自然條件下微生物的作用與具體的功能微生物。